УДК 617.713–002.9:616–002.18–089.843(092.9) 

https://doi.org/10.31288/oftalmolzh201613642

Воспаление роговой оболочки и пролиферативная активность клеток переднего эпителия при моделировании бактериального кератита и использовании амниотической мембраны с различным типом ее фиксации 

Е. В. Середа, В. В. Вит, д-р мед. наук, проф., Г. И. Дрожжина, д-р мед. наук, проф., Т. Б. Гайдамака, д-р мед. наук 

ГУ «Институт глазных болезней и тканевой терапии им. В. П. Филатова НАМН Украины»; Одесса (Украина) 

E-mail: evsereda08@gmail.com

Вступ. Молекулярні механізми впливу амніотічної мембрани на перебіг запального процесу і регенерації рогівки в даний час інтенсивно вивчаються з використанням різних біологічних маркерів. 

Мета дослідження. Визначити залежність між запаленням рогової оболонки і проліферативною активністю клітин переднього епітелію на підставі вивчення експресії Ki-67, CD-68, ММР-9 при моделюванні бактеріального кератиту і використанні амніотичної мембрани з різним типом її фіксації. 

Матеріал і методи. Експериментальне дослідження проведено на 60 кроликах (60 очей) породи шиншила, у яких моделювали бактеріальний кератит середнього ступеня тяжкості. Через два тижні кроликам проводили трансплантацію амніотичної мембрани із застосуванням техніки inlay (1 шар) з фіксацією амніону вісьмома вузлуватими швами нейлон 10/00 до рогівки і техніки onlay (1 шар) з фіксацією мембрани вісьмома вузлуватими швами шовк 8/00 до епісклери. 

Результати. У результаті проведеного дослідження відзначається наявність зворотного зв’язку між проліферативною активністю клітин переднього епітелію рогової оболонки і ступенем запальної інфільтрації строми рогівки, що підтверджується на підставі вивчення експресії таких маркерів репарації рогівки як: Ki-67, CD 68 і MMP-9. При наявності запалення відзначається зниження проліферативної активності епітеліоцитів переднього епітелію, що істотно знижує швидкість епітелізації і подальшої диференціації клітин по шарах. 

Висновок. Запальний процес і зниження швидкості епітелізації частіше відбуваються при фіксації амніотичної мембрани шовним матеріалом до поверхні рогівки, тобто в групі тварин, у яких застосовували inlay техніку трансплантаціі амніотичної мембрани. 

Ключевые слова: бактериальный кератит, амниотическая мембрана, эксперимент, биологические маркеры, репарация. 

Ключові слова: бактеріальний кератит, амніотична мембрана, експеримент, біологічні маркери, репарація.

Литература 

Середа Е. В., Дрожжина Г. И., Гайдамака Т. Б. Экспериментальная модель бактериального кератита средней степени тяжести // Офтальмология. Восточная Европа. — 2015. — №  2(25). — С.41–48. 

Barequet Irina S. Effect of Amniotic Membrane Transplantation on the Healing of Bacterial Keratitis / Irina S. Barequet, Z. Habot-Wilner, N. Keller, G. Smollan, H. Ziv, M. Belkin, M. Rosner // IOVS. — 2007. — Vol. 23. — P.124–130. 

Bauer D. Amniotic membrane transplantation induces apoptosis in T lymphocytes in murine corneas with experimental herpetic stromal keratitis / D. Bauer, S. Wasmuth, M. Hennig, H. Baehler, K. P. Steuhl, A. Heiligenhaus // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. — 2009. — V.50. — № 7. — P.3188–3198. 

Bauer D. Amniotic membrane induces peroxisome proliferator-activated receptor-? positive alternatively activated macrophages. / D. Bauer, M. Hennig, S. Wasmuth, H. Baehler, M. Busch, K. P. Steuhl, S. Thanos, A. Heiligenhaus // Invest Ophthalmol Vis Sci. — 2012. — № 53 (2). — P. 799–810. 

Bromley M. A comparison of proliferation markers (BrdUrd, Ki-67. PCNA) determined at each cell position in the crypts of normal human colonic mucosa / M. Bromley, D. Rew, A. Becciolini et al. // Eur. J. Histochem. — 1996. — Vol.40. — P. 89–100. 

Bruno S. Cell cycle dependent expression and stability of the nuclear protein by Ki-67 antibody in HL-60 cells / S. Bruno, Z. Darynkiewich // Cell. Prolif. — 1992. — Vol. 25 — P. 31–40. 

Dong Z. Small incision lenticule extraction (SMILE) and femtosecond laser LASIK: comparison of corneal wound healing and inflammation. / Z. Dong, X. Zhou, J. Wu, Z. Zhang et al. // Br J Ophthalmol. — 2014. — №  98(2). — P. 263–269. 

Fabiani С. Corneal Epithelial Proliferation and Thickness in a Mouse Model of Dry Eye. /C. Fabiani, S. Barabino, S. Rashid, M. Reza Dana // Exp Eye Res. — 2009. — № 89(2). — P. 166–1171. 

Gicquel J. J. Amniotic membrane transplantation in severe bacterial keratitis. / J. Gicquel, R. A. Bejjani, P. Ellies, M. Mercie, P. Dighiero // Cornea. — 2007. — Vol. 26. — P. 27–33. 

Hao Y. Identification of antiangiogenic and antiinflammatory proteins in human amniotic membrane / Y. Hao, D. H. Ma, D. G. Hwang, W. S. Kim, F. Zhang //Cornea. — 2000. — Vol. 19. — P. 348–352. 

Heiligenhaus A. Amniotic membrane transplantation improves experimental herpetic keratitis. Modulation of matrix metalloproteinase-9 / A. Heiligenhaus, H. Li, Y. Yang, S. Wasmuth, D. Bauer, K. P. Steuhl // Ophthalmologe. — 2004. — №  101(1). — P. 59–65. 

Holt P. R. Is Ki-67 a better proliferative marker in the colon then proliferating cell nuclear antigen? / P. R. Holt, S. F. Moss, A. M. Kapetanakis // Cancer. Epidimiol. Biomarkers. Prev. — 1997. — № 6. — P. 131–135. 

Kenney M. C. Identification of cell types in human diseased corneas. / MC Kenney, M. Chwa, B. Lin, G. H. Huang, A. V. Ljubimov, D. J. Brown // Cornea. — 2001. — №  20(3). — P. 309–316. 

Kim J. S. Amniotic membrane transplantation in infectious corneal ulcer / J. C. Kim, T. W. Hahn,W. C. Park // Cornea. — 2001. — Vol. 20. — P. 720–726. 

Kjaergaard N. Antibacterial properties of human amnion and chorion in vitro / N. Kjaergaard, M. Hein, L. Hyttel, et al // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. — 2001. — Vol. 94. — P. 224–229. 

Liu T. Amniotic membrane traps and induces apoptosis of inflammatory cells in ocular surface chemical burn / T. Liu, H. Zhai, Y. Xu, Y Dong, Y. Sun, X. Zang, J. Zhao // Mol Vis. — 2012. — № 18 (2). — P. 137–146. 

Ollivier F. J. Proteinases of the cornea and preocular tear film. / F. J. Ollivier, B. C. Gilger, K. P. Barrie, et al. // Vet Ophthalmol. — 2007. — Vol. — P. 199–206. 

Smorodinova N. Regulatory Impact of Amniotic Membrane Transplantation on Presence of Adhesion/Growth-Regulatory Galectins-1 and -7 in Corneal Explants from Acanthamoeba Keratitis Patients: Clinical Note / N. Smorodinova, H. Kaltner, K. Jirsov?, E. Hrdli?kov?-Cela, S. Andr?, T. Ku?era, K. Jr. Smetana, H. J. Gabius // Curr Eye Res. — 2015. — Vol. 4 — P. 1–7. 

Talmi W. P. Antibacterial properties of human amniotic membranes / W. P. Talmi, L. Sigler, E. Inge, Y. Finkelstein, Y. Zohar // Placenta. — 1991. — Vol. 12. — Р. 285–288. 

Tandon R. Amniotic membrane transplantation as an adjunct to medical therapy in acute ocular burns / R. Tandon, N. Gupta, M. Kalaivani, N. Sharma, J. S. Titiyal, R. B. Vajpayee. // Br J Ophthalmol. — 2011. — Vol. 95. — P. 199–204. 

Tseng S. C. Intraoperative mitomycin C and amniotic membrane transplantation for fornix reconstruction in severe cicatricial ocular surface diseases / S. C. Tseng, M. A. Di Pascuale, D. T. Liu, Y. Y. Gao, A. Baradaran-Rafii // Ophthalmology. — 2005. — Vol. 112. — P. 896–903. 

Tseng S. C. Suppression of transforming growth factor-beta isoforms, TGF-beta receptor type II, and myofibroblast differentiation in cultured human corneal and limbal fibroblasts by amniotic membrane matrix / S. C. Tseng, D. Q. Li, X. Ma // J. Cell Physiol. — 1999. — Vol.179. — P.325–335. 

Xiaoyong Yuan. Expression of Matrix Metalloproteinases during Experimental Candida albicans Keratitis / Y. Xiaoyong, B. M. Mitchell, K. R. Wilhelmus. // Invest Ophthalmol Vis Sci. — 2009. — №  50(2). — P. 737–742.