УДК  617.735-006.487:615.28:616-076.4

http://doi.org/10.31288/oftalmolzh202045055

Ультраструктурные изменения сетчатки кролика при однократном интравитреальном введении различных доз мелфалана

Н. Ф. Боброва, д-р мед. наук, проф., Т. А. Сорочинская, канд. мед. наук, Н. И. Молчанюк, канд. биол. наук, ст. науч. сотр., А. Ю. Братишко, мл. науч. сотр.

ГУ «Институт глазных болезней и тканевой терапии им В.П. Филатова НАМН Украины»;  Одесса (Украина)

E-mail: filatov.detskoe7@gmail.com

КАК ЦИТИРОВАТЬ:  Боброва Н. Ф. Ультраструктурные изменения сетчатки кролика при однократном интравитреальном введении различных доз мелфалана / Н. Ф. Боброва, Т. А. Сорочинская, Н. И. Молчанюк, А. Ю. Братишко // Офтальмол. журн. – 2020. – № 4. – С. 50-55. http://doi.org/10.31288/oftalmolzh202045055 

Актуальность. Интравитеральная химиотерапия (ИВХ) ретинобластомы (РБ) в настоящее время широко применяется при органосохранном лечении ретинобластомы и является наиболее перспективным методом. Однако до настоящего времени остается нерешенным целый ряд вопросов, касающихся дозировок цитостатика, его влияния на здоровую сетчатку на ультраструктурном уровне, отдаленных осложнений.

Цель. Выявить и оценить ультраструктурные изменения сетчатки кролика при интравитреальном (ИВ) введении различных дозировок Мелфалана.

Материалы и методы. Проведены клинические и электронно-микроскопические исследования 6 глаз 3 кроликов породы шиншилла одного возраста – 5-6 месяцев и веса – 2,5-3 кг. Выделено 3 группы глаз в зависимости от дозы однократно вводимого препарата: 1 группа – 5мкг на одну инъекцию, 2 группа – 10 мкг, 3 группа – 20 мкг по 2 глаз в конкретной группе. ИВ инъекция проводилась по стандартной методике. Во всех группах энуклеация произведена через 4 недели после инъекции. Забор материала для гистопатологического исследования (электронной микроскопии) после энуклеации производился по разработанной методике. Материал изучался под электронным микроскопом ПЭМ-100 - 01.

Результаты. ИВ введение Мелфалана не оказывало общего токсического воздействия на животных. Во все сроки наблюдения как в группах с меньшим, так и с более высокой концентрацией введенного ИВ цитостатика, кровоизлияний в сетчатку и стекловидное тело, разрывов и отслоения сетчатки не наблюдалось. Послеоперационный период проходил без осложнений. В 1 группе глаз, после однократной ИВ инъекции 5 мкг мелфалана очаговых изменений на глазном дне отмечено не было в течение всего периода наблюдения (4 недели). В остальных группах были выявлены изменения на глазном дне, от единичных мелких участков малозаметной депигментации до изменений в виде перераспределения пигмента с появлением более светлых и больших зон депигментации с прогрессированием и увеличением участков дегенерации сетчатки. 

Ультраструктурные изменения сетчатки соответствовали офтальмоскопической картине. Электронная микроскопия выявила деструктивные изменения в клетках пигментного эпителия (ПЭС), фоторецепторах (ФК), мюллеровских клетках. Минимальные изменения структур ПЭС и ФК отмечались при введении мелфалана в дозировке 5 мкг. Дозы 10 и 20 мкг вызывали грубые изменения клеток сетчатки с явлениями отека и гипертрофии, развитием деструкции и распада, дезорганизацию слоев сетчатки с утратой типичной ультраструктур и глиоз и некроз при однократной ИВ инъекции. 

Выводы. Из полученных нами результатов можно сделать вывод об относительной безопасности дозы 5 мкг и минимальной токсичности дозы 10 мкг при однократном введении. Доза 20 мкг даже при однократном введении вызывала грубые изменения клеток сетчатки с развитием глиоза и некроза.

Ключевые слова:  интравитреальная химитерапия, мелфалан, электронная микроскопия, сетчатка, эксперимент

Литература

1.Cassoux N. Intraocular treatments of a new orthotopic primary human retinoblastoma xenograft / N. Cassoux, F. Assayag, O. Chouchane, Mlik et al. / ARVO Program. – 2012. – P. 6869/D1199

2.Edelhauser H.F. Ophthalmic Drug Delivery Systems for the Treatment of Retinal Diseases: Basic Research to Clinical Applications / H.F. Edelhauser, C. Rowe-Rendleman, M. Robinson et al // Investigative Ophthalmology & Visual Science. – 2010. – V. 51(11). – P. 5403-5420.

3.Ericson L.A. Present therapeutic resources in retinoblastoma. / L.A. Ericson, B.H. Rosengren // Acta Ophthalmol. – 1961. – V. 39. – P. 569–576

4.Inomata M. Chemosensitivity profiles of primary and cultured retinoblastoma cells in a human tumor clonogenic assay. / M. Inomata, A. Kaneko // Jpn J Cancer Res. – 1987. – V. 78. – P. 858–868.

5.Kaneko A. Eye-Preservation Treatment of Retinoblastoma with Vitreous Seeding. / A. Kaneko, Suzuki S. // Japanese Journal of Clinical Oncology. – 2003. – V. 33. – P. 601-607

6.Reуnoldes E. S. The use of lead citrate at higt pH an electronopaque stain in electron microscopy // I. of Cell Biol. – 1963. – V. 17. P. 208-212.

7.Shah N. Intravitreal and Subconjunctival Melphalan for Retinoblastoma in Transgenic Mice / N. Shah, D. Pham, T. Murray et al // Journal of Ophthalmology.  – 2014. – P. 1-9.

8.Shimoda Y. Effects of intraocular irrigation with melphalan on rabbit retinas during vitrectomy. / Y. Shimoda, R. Hamano, K. Ishihara et al // Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. – 2008. – V. 246(4). – P. 501-508.

9.Ueda M. Study on conservative treatment of retinoblastoma - effect of intravitreal injection of melphalan on the rabbit retina. / M. Ueda, J. Tanabe, M. Inomata et al // Nihon Ganka Gakkai Zasshi. – 1995. – V. 99(11). – P. 1230-1235.

 

Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов, которые могли бы повлиять на его мнение относительно предмета или материалов, описанных и обсуждаемых в данной рукописи.. 

 

Поступила 24.04.2020